牦牛MT-IV基因克隆与序列分析

？采用RT-PCR方法，利用特异性引物YMT-IVSP1和YMT-IVSP2先克隆出牦牛BosgrunniensMT-IV的编码区序列全长，将其与人MT-IV基因全序列比对，设计2对引物分别克隆内含子1和内含子2，将获得序列拼接后得到了牦牛MT-IV外显子与内含子全长为2099bp（GenBankAccessionNo.EU665491），编码区序列长189bp，编码62个氨基酸，20个半胱氨酸残基，不含芳香族氨基酸，2个内含子的长度分别为1392和518bp。将牦牛MT-IV基因编码区序列和氨基酸序列BLAST搜索结果表明，MT-IV在物种间高度保守。牦牛MT-IV氨基酸序列与牛、绵羊、山羊、狗、家鼠、人和马的比对表明，MT-IV包含有金属硫蛋白（MTs）特有的C-X-C、C-C-X-C-C、C-X-X-C结构域，构建的系统发育树与比较生理学和形态学相同，表明牦牛MT-IV具有与其他哺乳动物相同的分子特性，有必要进行牦牛MT-IV在上皮细胞中表达量水平的研究。