紫花苜蓿耐羟脯氨酸变异体的筛选及抗性研究

？以紫花苜蓿Medicagosativa（敖汉苜蓿和龙牧801苜蓿）种子为材料，培养无菌幼苗。以无菌苗的茎段为外植体，诱导愈伤组织，并用叠氮化钠（NaN3）200mg/L对愈伤组织进行诱变，以脯氨酸类似物L羟脯氨酸（LHyp）作为选择压力，通过在含半致死浓度的LHyp（8mmol/L）选择培养基及无LHyp培养基上交替培养，分离出抗LHyp的愈伤组织变异体。该变异体以高脯氨酸含量为特征，其脯氨酸含量分别比原型高2.84倍（敖汉）和3.17倍（龙牧801），同时进一步测定其生理生化指标，发现变异体的可溶性糖含量是对照的1.56（敖汉）倍和1.76倍（龙牧801），过氧化物酶（POD）活性与原型相比差异极显著。分别对2种苜蓿愈伤组织进行聚乙二醇（PEG）（敖汉）和低温（龙牧801）胁迫处理，结果显示，变异体具有更强的抗逆性（抗旱、抗寒），能更好的适应恶劣（干旱、寒冷）的生长环境。