本氏针茅SRAPPCR反应体系的建立及引物筛选

？以本氏针茅（Stipabungeana）幼嫩叶片为材料，建立适合本氏针茅基因组DNA提取的改良CTAB法，在此基础上采用正交试验设计和单因素分析相结合的方法，对本氏针茅SRAPPCR反应体系中的5个主要因素（DNA、Taq酶、dNTPs、Mg2+和引物）进行优化，旨在建立适合本氏针茅SRAP分析的反应体系。结果表明，在20μL总的反应体系中各组分的加入量分别为DNA（20ng·μL-1）3μL、TaqDNA酶(5U·μL-1)0.2μL、dNTPs（2.5mmol·L-1)1.4μL、引物（10μmol·L-1）1.0μL、Mg2+？(25mmol·L-1)2.0μL、10×Buffer2.5μL、ddH2O8.9μL。体系验证和引物筛选试验表明，该体系适于本氏针茅遗传多样性分析，该体系的建立可为本氏针茅种质资源遗传多样性研究和黄土高原植被恢复及生态建设提供理论基础。