野生大豆DREB基因cDNA的克隆与分析

？以野生大豆Glycinesoja叶片总RNA为模板，根据其他双子叶植物DREBP/AP2结构域的保守氨基酸序列设计简并引物，通过降落和巢式PCR进行扩增，获得1条190bp的cDNA片段。以此序列设计引物，采用RACE扩增3’和5’末端未知序列，最终克隆到野生大豆DREB全长基因（GsDREB）。该基因1191bp编码395个氨基酸，基因内部没有内含子。氨基酸分析表明，其N末端具有核定位信号（nuclearlocalizationsignal,NLS），并具有由58个氨基酸编码的、能够与DNA结合的保守区域DREBP/AP2结构域。通过多序列比对分析，该基因与拟南芥ArabidopsisthalianaDREB2C氨基酸序列相似性最高，推测其为DREB2亚家族的成员。