小叶锦鸡儿SSRPCR体系优化及应用

？为建立适宜小叶锦鸡儿（Caraganamicrophylla）SSRPCR的反应体系，利用正交试验设计L16(45)，对模板DNA、Mg2+、dNTP、引物和TaqDNA聚合酶的浓度进行五因素四水平优化筛选，确立最佳反应体系和扩增程序。即在25μL反应体系中包括40ng模板DNA，3mmol/LMg2+，300μmol/LdNTP，0.6μmol/L引物，1UTaqDNA聚合酶，1×Buffer。扩增反应程序为94℃10min；94℃45s，65℃1min，72℃1min，10个循环，每循环的复性温度递减1℃；94℃45s，55℃1min，72℃1min，30个循环；72℃10min，4℃保存。应用该优化体系对小叶锦鸡儿种质资源及不同引物进行了检验及筛选。本研究表明，该体系的建立为今后利用SSR标记对小叶锦鸡儿属遗传多样性研究、遗传图谱构建及种质资源鉴定等研究工作提供依据。