胶束电动色谱法测定蛋白质表面自由氨基有机化学

建立了一种毛细管电泳测定蛋白质分子表面自由氨基的方法.配制蛋白质样品溶液,分取5等份,分别加入过量的不同摩尔数的芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺(FMOC-OSu)溶液,室温下反应30min后,用胶束电动色谱测定蛋白质溶液中剩余的FMOC-OSu的峰面积.以FMOC-OSu的峰面积对加入的FMOC-OSu的摩尔数做校准曲线.该直线外推到峰面积为0时所对应的FMOC-OSu摩尔数即为参加反应的蛋白质表面的氨基的摩尔数.因此可以计算出蛋白质表面的氨基数目.用甘氨酸检验了本方法的可靠性.以牛血清白蛋白为蛋白质模型,测得其表面氨基数为32,和文献报道值一致.该方法简单易行并且反应条件温和,可用于测定蛋白质修饰过程中的平均修饰度