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中国科学 生命科学 2000
高效液相色谱-电喷雾四极杆离子阱质谱鉴定蛋白质磷酸化位点*, PP. 421-427 Keywords: 蛋白质磷酸化位点,鉴定,高效液相色谱-离子阱质谱联用 Abstract: 运用高效液相色谱和电喷雾四极杆离子阱质谱(HPLC-ESI-QITMS)联用技术鉴定了两种天然磷酸化蛋白——牛β-酪蛋白(β-casineβ和牛髓磷脂碱性蛋白(myelinbasicprotein,MBP)的磷酸化位点.用胰蛋白酶酶解蛋白质,高效液相色谱(HPLC)分离酶解肽段,电喷雾离子阱质谱(ESI-ITMS)在线测定完整肽段的分子量,同时结合碰撞诱导解离(CID)技术获得肽段的MS/MS谱.根据测定得到的肽段分子量比预计的分子量大80或其整倍数,判定某一肽段存在磷酸化修饰;再根据其MS/MS谱解析(人工解析或蛋白质数据库自动搜寻)肽段的序列,鉴定磷酸化位点.
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