华癸中生根瘤菌7653R共生质粒pMH7653Rb的不相容性行为

华癸中生根瘤菌菌株7653R含有2个内源质粒(pMH7653Ra,pMH7653Rb).用三亲本杂交法将7653R的共生质粒pMH7653Rb分别导入HN308SR(Smr,Rifr;含pMHHN308a,pMHHN308b和pMHHN308c)和HN3015SR(Smr,Rifr;含pMHHN3015a,pMHHN3015b和pMHHN3015c).发现受体菌HN308SR的两个稳定内源质粒pMHHN308b和pMHHN308c随着pMH7653Rb的导入而同时被消除.该接合子命名为HN308SRN14.这一结果表明pMH7653Rb与pMHHN308b和pMHHN308c不相容,可以归于同一不相容群.另一转移接合子HN3015SRN14的质粒图谱显示其第二大质粒pMHHN3015b由于pMH7653Rb的导入而被消除.该结果表明,pMH7653Rb与pMHHN3015b不相容.植物结瘤实验结果表明,pMH7653Rb的导入能恢复HN308SRN14的结瘤能力,其结瘤数目超过HN308SR,但不能替代pMHHN308b和pMHHN308c的固氮作用,HN308SRN14失去了固氮能力.质粒消除突变株HN308SRN14D只含有pMHHN308a,能形成少量无效根瘤,确认pMHHN308a与HN308的结瘤能力有关.HN3015SRN14(含pMH7653Rb,pMHHN3015a和pMHHN3015c)只能形成无效根瘤,而质粒消除突变株HN3015SRN14D(仅含pMHHN3015a和pMHHN3015c)则完全失去结瘤能力.通过PCR反应从7653R,HN308,HN3015,HN308SRN14,HN3015SRN14中均检测到质粒复制基因repC.供试菌株的repC基因序列相似性达到99%.