人GM-CSF受体β链胞膜外区域与GM-CSF结合位点的研究

研究了抗人GM-CSF受体β链胞膜外区域4种人工合成多肽D1(9～114),D2(115～225),D3(226～325)和D4(326～422)4个多肽片段多克隆抗血清和McAb对GM-CSF生物学活性的阻断作用,结果首次发现抗D1多克隆抗血清和抗D1McAb2A_9对GM-CSF促进的DMSO诱导的HL60细胞、正常人胎儿骨髓细胞以及人GM-CSF依赖的TF-1细胞增殖有显著的阻断效应,抗D2McAb1C12对GM-CSF诱导的TF-1细胞增殖也有显著的阻断效应,阻断抑制率均可达90％以上,而其它抗受体β链McAb和无关对照McAbE7均无阻断活性.此结果表明:抗D1McAb2A9和抗D2McAb1C12所识别的表位则可能为受体β链与GM-CSF的结合位点依据受体β链二级结构预测,受体与细胞因子结合部位的结构理论,设计和合成了受体β链45～75,56～75和66～753个人工合成多肽片段,用间接ELISA结合试验分析表明,McAb2A9识别表位位于第45～55位氨基酸内.应用受体与细胞因子结合部位的结构理论推测McAb1C12识别表位可能位于β链内216～220位氨基酸.此结果对于深入了解受体β链的结构与功能以及细胞因子与受体的相互作用均有十分重要的意义.