黑曲霉诱变株AspergillusnigerT21糖化酶产量提高的分子基础

黑曲霉AspergillusnigerT21是以A.nigerAS3.795为出发株经诱变获得的糖化酶高产菌株,产量比原株提高10~17倍.Northern分析知T21的糖化酶mRNA含量约为AS3.795的20倍,表明糖化酶基因(glaA)转录水平的提高是糖化酶产量提高的主要原因.以编码葡糖苷酸酶(GUS)的E.coliuidA为报告基因,分别与T21和AS3.795的glaA5′调控区融合后,引入A.niger,根据转化子GUS酶活性测定结果,T21glaA5′调控区的启动子活性是AS3.795相应启动子活性的3倍多,提示cis调控的改变是T21glaA转录水平提高的重要原因之一,但trans调控的改变是T21glaA转录水平提高的更重要的原因.作为trans调控研究的第1步,进行了T21glaA5′调控区的功能分析,结果表明,ATG上游-408~-513间的约100bp区域与glaA基因高水平表达相关.