嵌套多重PCR——研究田间植物部分丛枝菌根真菌和微生物区系的一个可行技术

对感染植物根部的丛枝菌根真菌进行准确鉴定是菌根研究的基础,而仅仅通过形态学特征不可能将根内菌根真菌鉴定到种.为了快速、准确而又经济地鉴定植物根内与根际的菌根真菌区系,本研究设计和应用了嵌套多重聚合酶链式反应(PCR)技术.本研究中,首先对所用PCR引物进行了种特异性验证和相容性分析.对4种孢子HAUO3,Glomusintraradices,Scutellosporacastaneae和Glomussp.HAUO4的研究结果表明,嵌套PCR具高度敏感性.在嵌套多重PCR的可行性研究中,应用混合孢子样品,于温室条件下培养得到的4种菌根真菌共感染的紫云英根段,以及于田间采集得到的15种植物的根段.结果证明,嵌套多重PCR反应同样具有高度敏感性,准确率达到95%.同时检测到4种菌根真菌对植物的感染,证明了此实验技术具高度敏感性、高效性,是菌根研究的一种新的简易、经济而又切实可行的方法.