葱蝇冬滞育蛹的全长cdna文库的构建

葱蝇deliaantique-lib。经鉴定，原始文库的滴度为2.4×107cfu/ml。随机挑取15个克隆，经pcr快速鉴定，插入片段大小在0.5～3kb之间，平均大小在1kb左右，重组率达100%。结果表明该研究获得高质量的葱蝇冬滞育蛹cdna文库。(meigen)具有冬滞育的特性且与黑腹果蝇drosophilamelanogaster近缘。该研究目的在于构建葱蝇冬滞育蛹的全长cdna文库，为进一步的冬滞育专化基因筛选、克隆、和表达分析奠定基础。利用rnaiso试剂盒提取葱蝇冬滞育蛹的总rna，采用smart技术合成全长cdna，经sfiⅰ酶切消化后，将cdna克隆到质粒载体pdnr