二斑叶螨对联苯菊酯抗药性的pasa快速检测技术建立与应用

【目的】二斑叶螨tetranychusurticaekoch是世界性的重要农业害螨，其抗药性发展严重阻碍了对该螨的科学防控。为了实现田间二斑叶螨对菊酯类杀虫剂抗药性的早期快速检测，本研究拟建立二斑叶螨对联苯菊酯的特异性等位基因pcr（pcramplificationofspecificalleles，pasa）检测技术。【方法】玻片浸渍法测定了联苯菊酯对二斑叶螨不同种群的毒力，克隆了二斑叶螨钠离子通道结构域iiis6的dna片段，基于该片段中包含的抗性和敏感种群中的点突变，建立了pasa检测技术，并应用于二斑叶螨不同种群中抗性基因f1538i点突变频率的检测。【结果】与室内相对敏感种群相比，二斑叶螨北京通县和海南三亚种群均对联苯菊酯产生了抗药性，lc50分别为1982.6mg/l和2767.4mg/l，抗性倍数分别为6.0倍和8.4倍；pasa检测结果表明二斑叶螨室内相对敏感种群中存在杂合子个体，f1538i点突变频率为10.0%，而北京通县和海南三亚种群中该突变频率则分别达50.0%和53.3%。【结论】建立的pasa技术可以快速检测二斑叶螨田间种群是否存在与击倒抗性相关的基因点突变，从而判断其对菊酯类杀虫剂的抗药性发展。