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ISSN: 2333-9721
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显微注射构建烟粉虱的rnai技术体系

Keywords: rna干扰,显微注射,烟粉虱,dsrna,实时荧光定量pcr

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Abstract:

rnai已经成为揭示基因功能的一个常用的有力工具。在昆虫rnai技术体系中,通过显微注射方法向昆虫体内注入dsrna,实现系统性干扰,是最为广泛采用的方法。但对于体型较小的昆虫,注射法操作存在较大的难度,特别是非常微小的昆虫烟粉虱bemisiatabaci。为了进行烟粉虱大规模基因功能验证,需要开发一套成熟的rnai技术体系。本研究以烟粉虱的cyp6cm1基因为目标基因,通过显微注射法注射不同浓度的dsrna到烟粉虱4龄若虫,荧光定量pcr检测其沉默效果。结果表明:在对单头烟粉虱注射50nl时,注射不同浓度的dsrna,对cyp6cm1基因的沉默效果不同,最大沉默效率可达到80%以上。因此,本实验成功构建了烟粉虱的rnai技术体系,也可用于其它粉虱类害虫的rnai技术。

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