一步法rt-pcr和两步法rt-pcr对蜜蜂病毒诊断研究的比较

【目的】探讨适合蜜蜂病毒病诊断的rt-pcr技术。【方法】从感染蜜蜂以色列急性麻痹病毒、残翅病毒、囊状幼虫病毒、急性麻痹病毒、黑蜂王台病毒以及慢性麻痹病毒的阳性样品中，分别提取这6种病毒的rna。然后，同时应用一步法rt-pcr和两步法rt-pcr的反应体系对6种病毒扩增，并对两种方法的灵敏性进行比较和分析。【结果】上述两种方法分别得到158(iapv)、269(dwv)、342(sbv)、460(abpv)、536(bqcv)和774bp(cbpv)的扩增片段，测序结果证实扩增片段符合预期。两步法rt-pcr可检测到更低浓度的病毒颗粒。【结论】结果表明，该2种方法均可快速、有效地诊断蜜蜂病毒。但两步法rt-pcr灵敏性更高。