Actividad glutatión S-transferasa en la membrana sinovial de la articulación metacarpofalángica equina normal y alterada Glutathione S-transferase activity in synovial membrane of normal and altered equine metacarpophalangeal joint

La glutatión S-transferasa (GST) se ha descrito en las fracciones citosólica y microsomal de células de diferentes tejidos, en los que cataliza la conjugación de glutatión con xenobióticos, desempe ando un papel en la inactivación de radicales libres. En este estudio se determinó la GST de la membrana sinovial de la articulación metacarpofalángica de equinos criollos de entre 1,5 y 4 a os de edad, provenientes de mataderos, sin distinción de sexo. Según el aspecto macroscópico de las articulaciones las muestras se clasificaron como normales (n = 16), o alteradas (n = 16). Tanto las membranas sinoviales normales como las alteradas se agruparon en cuatro conjuntos de cuatro muestras cada uno. Tanto en el líquido sinovial como en cada conjunto se determinó la concentración de proteínas. La actividad GST y sus parámetros cinéticos Km app y la Vmáx app se determinaron en los homogeneizados, fracciones citosólica y microsomal, con el objeto de caracterizar la actividad enzimática. Los resultados muestran que la actividad GST está presente en todas las fracciones analizadas. La Vmáx app y la razón Vmáx app/Km app, resultaron ser significativamente menores en las muestras alteradas respecto de las muestras normales. Por otro lado, se observó una disminución de la afinidad de la enzima por sus sustratos en las muestras alteradas. Esto puede relacionarse con la modificación de grupos químicos de la enzima provocada por el estrés oxidativo asociado a las muestras alteradas. Alternativamente, la expresión de enzimas con parámetros cinéticos diferentes (isoenzimas) podría dar cuenta de la diferencia observada entre las muestras alteradas y normales. The activity of glutathione S-transferase (GST) has been described in the cytosol and microsomes from cells of various tissues, where it catalyzes the conjugation of glutathione with xenobiotics. This activity also has an important role related to the inactivation of free radicals. The GST activity was measured in the synovial membrane of the metacarpophalangeal joint from equine aged between 1.5 and 4 years, coming from slaughterhouses, without distinction as to sex. According to the macroscopic appearance, joints samples were classified as normal (n = 16), or altered (n = 16). Both the normal synovial membranes and the altered were grouped into 4 sets of 4 samples each. In the synovial fluid and in each of these sets the concentration of proteins was measured. The GST activity was measured in the homogenized, cytosolic and microsomal fractions. Also, values of Km app and Vmax app were estimated for each of the fraction