Purification and Characterization of an Alkaline Phosphatase Induced by Phosphorus Starvation in Common Bean (Phaseolus vulgaris L.) Roots

Dos isoformas de fosfatasas obtenidas de raíz de frijol (Phaseolus vulgaris L.) mostraron un incremento en la actividad enrespuesta a la deficiencia de fosfato. Una de ellas (APIII) se purificó a través de una cromatografía de intercambio iónico y una electroforesis preparativa. La masa molecular estimada para APIII fue de 35 kDa tanto por SDS-PAGE como por filtración molecular, sugiriendo que la enzima activa es monomérica. APIII se clasificó como una fosfatasa alcalina basada en sus requerimientos de pH 8 para catálisis. Esta enzima es activa sobre un amplio espectro de sustratos como polifosfato, glucose 1-fosfato y fosfoenolpiruvato, aunque muestra preferencia por pirofosfato. Su actividad se inhibe completamente por molibdato, vanadato y fosfato, aunque es inhibida parcialmente por fluoruro. Aún cuando los cationes divalentes no fueron escenciales para su actividad, la hidrólisis de pirofosfato se incrementó notablemente en presencia de Mg2+.