lmmunoenzymatyczna metoda oznaczania przeciwcial antymitochondrialnych M2 w surowicach chorych na pierwotna ó ciow marskosc wqtroby

Celem pracy by o opracowanie immunoenzymatycznego testu (ELISA) do oznaczania przeciwcia antymitochondrialnych M2. Oznaczanie przeciwcia M2 ma zasadnicze znaczenie diagnostyczne w pierwotnej ó ciowej marsko ci w troby (PBC). Zastosowano nast puj c procedur : antygenem M2 (Sigma) op aszczano polistyrenowe p ytki mikrotitracyjne. P ytki ze zwi zanym antygenem inkubowano z rozcieńczon surowic (minimalne rozcieńczenie 1 tys., kolejne rozcieńczenia dwukrotnie wi ksze), a potem z przeciwcia em przeciwko IgG ludzkim znakowanym peroksydaz . Nast pnie przeprowadzano reakcj z substratem peroksydazy i odczytywano absorbancj przy 450 nm. Wspó czynnik zmienno ci wewn trzseryjnej metody wynosi 3,5-7,8%, a zmienno ci mi dzyseryjnej 9,8-10,1%. Na podstawie opracowanego testu zbadano 73 surowice chorych na PBC. Wyst powanie przeciwcia M2 stwierdzono u 67 chorych (91,8%). Miano przeciwcia by o bardzo wysokie; tylko w dwóch przypadkach wynosi o 1:103 (tj. minimalne rozcieńczenie surowicy), natomiast a w 64,4% wynosi o 1:105 i wi cej. W grupie 170 chorych ze schorzeniami innymi ni PBC przeciwcia a M2 o niskim mianie wykryto w dwóch przypadkach: u osoby chorej na przewlek e zapalenie w troby i u osoby chorej na chorob Hashimoto. Przeciwcia M2 nie wykryto w adnej z 57 surowic zdrowych. Opracowany test charakteryzuje si du czu o ci (91,8%) i specyficzno ci (99,1%). Wykonanie oznaczenia jest proste i szybkie.