Deteccion de beauvericina en el hongoentomopatogeno Beauveria bassiana mediante el uso de anticuerpos policlonales Detection of Beauvericin in the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana by using polyclonal antibodies

El hongo entomopatògeno Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin es una buena herramienta para el control biologico de insectos que atacan cultivos de importancia economica. Este hongo produce una toxina ciclo hexadepsipeptida que muestra actividad biologica como insecticida. El objetivo de este estudio fue producir anticuerpos policlonales que pueden ser utilizados para cuantificacion inmunologica de la produccion de beauvericina en siete (7) aislamientos de B. bassiana (Bb) provenientes de la micoteca de Cenicafe-Colombia. Cultivos liquidos Sabouraud se inocularon con 3,0 X 10(5) conidios/ml de cada aislamiento de B. bassiana y los extractos se filtraron y se evaluaron a los 7, 9 y 11 dias de crecimiento. Los anticuerpos se obtuvieron a traves de dos aplicaciones intramusculares a conejos de la raza Mueva Zelanda. Las inyecciones contenian 2,5 mg del inmunogeno emulsificado en adjuvante completo de Freund's para la primera y adjuvante incompleto de Freund's para la segunda aplicacion, respectivamente. Las pruebas serologicas utilizadas en este experimento fueron ELISA y Dot - blot. Los resultados mostraron diferencias en la produccion de la toxina entre los siete aislamientos del hongo B. bassiana. Se presentaron picos de produccion de la toxina entre los 9 y 11 dias de cultivo. Los niveles detectados de beauvericina fluctuaron entre 1,16 ug / ul para el aislamiento B. bassiana 9610 y 1.57 ug/ul para el aislamiento B. bassiana 9205. Con esta metodologia se podran seleccionar aislamientos mas eficientes para producir la toxina, los cuales pueden ser incorporados en los programas de manejo integrado de plagas. The entomopathogenic fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin is a good tool for biological control of insects that attack economically important crops. This fungus produces a ciclohcxadepsipeptide toxin that exhibits biological activity as an insecticide. The objective of this research was to produce polyclonal antibodies (Pabs) that could be used for the immunologicai quantification method in order to quantify of the produccion of beauvericin in seven (7) strains of B. bassiana (Bb) from the collection of Cenicafe-Colombia. Liquid cultures of Sabouraud s medium were inoculated with 3,0 x 10* conidia/ml of each isolate and these extracts were filtered and evaluated at 7, 9 and 11 days of growth. Pabs were obtained through two intramuscular injections in New Zealand white rabbits. The injections contained 2,5 mg of the emulsified immunogen with Freund's complete adjuvant for the first injection and with Freund's incomplete adjuvant for the second.