Kinetic changes in activity of HR-peroxidase, induced by very low doses of phenol Cambios cin ticos en la actividad de la HR-peroxidasa inducidos por dosis muy bajas de fenol Mudan §as cin ticas na atividade da HR-peroxidade induzidas por doses muito baixas de fenol

The allosteric protein of horseradish peroxidase (HRP) shows two main types of activity, peroxidase and oxidase, depending on the kind of low molecular effectors. The effects of very low doses of phenol, prepared by successive dilutions in water or in 75% ethanol, on initial HRP activity in oxidation of o-dianisidine or luminol were tested in a systematic manner by colorimetric and luminometric methods. Results showed that phenol dilutions, including those below Avogadro ￠a a ￠s number, could activate or inhibit HRP in peroxidase and oxidase type reactions with a sinusoidal pattern. Km values for the studied substrates changed parallel to HRP peroxidase/oxidase activity and the maximum activity in the peroxidase reaction corresponded to the minimum activity in the oxidase reaction and vice versa. The effect also depended on the type of dilutor. The observations of the peroxidase/oxidase oscillations in the sinusoidal pattern of HRP activity, dependent on the rate of phenol dissolution and the time of preincubation, point out to the conclusion that HRP might be a good model for high dilutions research. The experiments provide strong evidence that horseradish peroxidase (HRP) is a very sensitive detector of subtle changes in the concentration of phenol used as a cofactor in the peroxidase/oxidase reaction. Keywords: HR-peroxidase, peroxidase-oxidase, phenol, hormesis, homeopathy, high dilutions. Mudan §as cin ticas na atividade da HR-peroxidade induzidas por doses muito baixas de fenol Resumo A prote -na alost rica da peroxidase do rabano (HRP) mostra dois tipos principais de atividade, peroxidase e oxidase, de acordo com o tipo de efetores de baixa molecularidade. Os efeitos de doses muito baixas de fenol, preparadas atrav s de dilui § μes sucessivas em gua ou etanol 75% na atividade inicial da HRP sobre a oxida § ￡o da o-dianisidina ou luminol for testados de modo sistem tico atrav s de m todos colorim tricos e luminom tricos. Os resultados mostram que as dilui § μes de fenol, incluindo aquelas por baixo do n omero de Avogadro, foram capazes de ativar ou inibir a HRP em rea § μes de tipo peroxidade e oxidase com um padr ￡o sinusoidal. os valores Km dos substratos estudados variaram paralelamente atividade peroxidase/oxidase da HRP; a atividade m xima da rea § ￡o peroxidase correspondeu atividade m -nima na rea § ￡o oxidase e vice-versa. O efeito tamb m se mostrou dependente do tipo do solvente. A observa § ￡o das oscila § μes sinusoidais na atividade da HRP, depen