Determination of hydroxyproline in collagenous proteins by high performance liquid chromatography-mass spectrometry
高效液相色谱-质谱联用测定胶原蛋白中的羟脯氨酸

建立了一种简单、快速地测定胶原蛋白中羟脯氨酸（HYP）的高效液相色谱-电喷雾质谱（HPLC-ESI/MS）方法。胶原蛋白经酸水解后，以乙腈-0.05%的三氟乙酸水溶液（体积比为5∶95）为流动相，以1.0mL/min的流速在C8反相柱上进行分离。以茶氨酸为内标，利用质谱定性定量测定HYP。在电喷雾正离子模式下，对m/z132和m/z175离子进行选择离子监测。在11.7～117mg/L范围内，HYP与内标物茶氨酸的峰面积比和HYP的质量浓度呈良好的线性关系，相关系数为0.9993。含量测定的相对标准偏差为1.87%，回收率为97.85%～101.76%。此方法流动相简单，分析时间短且无需衍生处理，抗干扰能力强，能准确快速地测定胶原蛋白中HYP的含量。