鳜鱼（S.Keneri）肌球蛋白重链基因cDNA的克隆及其特征分析

鳜鱼（S.Keneri）以优良肉质性状成为极具商品价值和大力推广人工养殖名贵鱼类之一.为掌握控制优良肉质性状的遗传基础，采用同源克隆RT-PCR方法，克隆出该鱼肌球蛋白重链（MYH）cDNA序列.该基因cDNA序列全长5938bp，编码区长度为5814bp，含有poly（A）信号,3’非翻译区长124bp,其开放阅读框共编码1938个氨基酸，推算蛋白质分子质量为221。6Ku.鳜MYH基因由3个结构域组成， 即MYSc-type-II， SMC-N和Myosin tail 1， 其中MYSc-type-II头部结构与鲤、 斑马鱼同源性达90%，具高度保守性.通过DNAstar 软件MegAlign构建进化树显示不同物种间该基因核苷酸编码序列同源性为77%—86%，氨基酸编码序列同源性达80%—92%.采用RT-PCR方法研究MYH在不同发育阶段差异表达结果表明,MYH在肌肉效应期开始有低量表达，成鱼期和鱼苗期表达量高，而囊胚期与神经胚均未表达.由此推测MYH基因于肌肉效应期开始表达.研究结果揭示鳜鱼肌球蛋白重链基因在进化上保持与其他脊椎动物相似性和差异性，为决定名贵鱼类肉质结构基因的研究提供了分子生物学基础.