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自然科学进展 2008
新的STK11互作蛋白LOH12CR1的筛选及鉴定Keywords: STK11,互作蛋白,LOH12CR1,免疫荧光,免疫共沉淀,互作蛋白,切入点,生物学功能,共定位,发现,定位实验,免疫荧光,激酶,免疫共沉淀技术,方法,质谱分析,结合,融合蛋白,诱导表达,重组载体,原核表达系统,利用,研究,机制,调节作用 Abstract: PJ综合征(Peutz-Jeghers syndrome,PJS)的疾病基因STK11编码由433个氨基酸残基组成的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶STK11,具有调控细胞周期,调节细胞极性以及细胞基础能量代谢等重要功能.STK11蛋白羧基端含有123个残基,对STK11生物学功能的实现起着调节作用,但机制尚未明确.本研究利用pGEX4T-2原核表达系统,构建pGEX4T-2-STK11羧基端重组载体,并诱导表达了GST—STK11羧基端融合蛋白,采用GST—pull down结合质谱分析的方法,鉴定出STK11羧基端的可能互作蛋白LOH12CR1.通过免疫共沉淀技术证实了STK11激酶同LOH12CR1互作;免疫荧光共定位实验亦发现STK11与LOH12CR1共定位.STK11与LOH12CR1互作的发现为研究STK11的功能提供新的切入点.
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