人血管生成抑制素基因的克隆、序列分析及其在大肠杆菌中的表达

血管生成抑制素是新发现的一种血管生成抑制因子，能抑制肿瘤的生长和转移，有临床应用前景．根据血管生成抑制素是纤溶酶原的一个内片段的特点，以人纤溶酶原cDNA为模板，用PCR扩增出人血管生成抑制素基因，经序列分析后克隆至质粒pBV220转化大肠杆菌DH5α，在温度诱导下获得高效表达．SDS-PAGE及West-ern印迹分析显示：表达产物占菌体总蛋白的38％，相当于212mg／L，并具有免疫活性．生物活性分析结果表明，重组人血管生成抑制素能抑制bFGF诱导的CAM血管生成、抑制C57BL／6小鼠皮下原位B16黑色素瘤生长．