用EST和SSR标记定位水稻温敏不育基因tms5

利用cDNA抑制差减杂交技术建立了水稻减数分裂时期穗部特异表达的SSH文库，从中筛选121个cDNA片段作为EST（expressed sequence tags）标记，用RFLP（restriction fragment length polymorphism）方法分析了温敏不育系安农S-1和正常品种安农N之间的多态性，其中一个EST标记HN57可以检测到亲本间的多态性．共分离分析结果表明，HN57与安农S-1的温敏不育性完全共分离，进而将安农S-1的温敏不育基因tms5定位于RGP（ricegenome research program）遗传图的第二染色体的31．2cM处．为了进行精细定位，在该区域设计了80对SSR（simple sequence repeat）引物对，用12对多态性引物将tms5定位于181kb区间