尾静脉大容量快速注射法介导的人凝血因子Ⅸ基因在小鼠肝内的高效表达

尾静脉大容量快速注射裸质粒DNA能够介导外源基因在动物肝内高效表达，采用此方法将人凝血因子Ⅸ(hFIX)表达质粒pCMV-hFIX 2.2mL于7s内导入小鼠体内，hFIX在小鼠体内表达水平最高为2921ng/mL(血浆）。hFIX表达水平与裸质粒DNA注射剂量呈正相关，重复注射的hFIX表达水平偏低（最高1459ng/mL)。PCR检测发现小鼠多种器官中存在hFIX cDNA，RT－PCR和免疫组化切片检测表明，hFIX mRNA和蛋白主要在肝脏中表达。转氨酶水平与病理切片检测表明，注射1d后5％的肝脏细胞受到损伤，但在3－10d内恢复。研究结果表明，尾静脉大容量快速注射法能够介导hFIX在小鼠体内高水平表达，为基因治疗研究提供了一项简便而实用的动物实验手段。