疫霉菌激发子PB90诱导烟草悬浮细胞的凋亡

激发子 PB90 是疫霉菌(Phytophthora boehmeriae)分泌的一种分子量为90 kD 的胞外蛋白激发子,该激发子可以诱导非寄主植物烟草的过敏反应和系统获得抗性. BY-2烟草悬浮细胞经该激发子PB90处理后, Trypan blue 染色观察到细胞死亡, 这种死亡可被蛋白质合成抑制剂 Cycloheximide 抑制, 表明这种细胞死亡是主动死亡过程. 提取 PB90 处理的悬浮细胞的 DNA 进行琼脂糖凝胶电泳观察到 DNALadder 现象, 表明核小体间的 DNA 发生了断裂; 对经 PB90 分别处理 4 和 12 h 的烟草悬浮细胞进行TUNEL 染色, 观察到较强的阳性信号, 进一步表明其细胞核内发生了 DNA 末端断裂; 同时结合 DAPI染色观察到经 PB90 处理后的细胞染色质凝集、细胞核解体形成凋亡小体等细胞凋亡的形态学特征. 上述结果表明激发子 PB90 可以诱导 BY-2 烟草悬浮细胞发生细胞凋亡, 提示该激发子诱导的过敏反应是一个细胞凋亡过程.