口蹄疫病毒OH/CHA/99株全长基因组感染性克隆的构建

以构建的口蹄疫病毒OH/CHA/99株全长cDNA为模板，使用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录，得到病毒RNA．用脂质体转染法将转录物RNA导入BHK细胞，可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病变效应．对收获的病毒分别用RT-PCR，乳鼠毒力试验以及免疫电子显微镜观察等方法进行鉴定，结果表明拯救到特定的口蹄疫病毒．同时用空斑实验法观察了拯救病毒及其亲本毒株的生长特性，结果表明二者在致病性上没有明显差异，这将为进一步探索猪口蹄疫病毒致病的分子机制及研制新型口蹄疫疫苗奠定良好的基础．