3-酮硫裂解酶基因phbA的克隆、序列分析及功能检测

用聚合酶链式反应扩增并克隆了真养产碱杆菌中合成聚－β－羟基丁酸酯（ＰＨＢ）的一个关键酶－３－酮硫裂解酶基因ｐｈｂＡ。ＤＮＡ序列分析表明，所克隆的基因与国外报道序列同源性很高，只有１个碱基的区别。为了检测该基因的功能及导肽的定位效率，构建了带有导肽基因的组成型表达载体，并转化烟草得到转基因植株。蛋白质电泳结果表明，导肽可以将外源蛋白定位于质体，ｐｈｂＡ基因能翻译成相应大小的蛋白。酶活性分析证实，转基