植物幼小原胚的电激转化

用电激法将外源报告基因导入植物原胚获得瞬间表达．用酶解和显微解剖法分离出烟草含８～３２个细胞的幼小原胚与含２５０～４００个细胞的球形胚，导入ＧＵＳ和ＧＦＰ基因后，置于ＫＭ８ｐ培养基 １～２ｄ．当电场强度为 ５００～１５００ Ｖ／ｃｍ时，可检测到 ＧＵＳ蓝色反应和 ＧＦＰ绿色荧光，其中幼小原胚在电场强度为 ７５０ Ｖ／ｃｍ时，外源基因瞬间表达频率最高，为 ２．２％，球形胚在电场强度为１２５０ Ｖ／Ｃｍ时表达频率最高为 ５．９％．若以转化细胞占胚细胞总数的比例为有效转化频率，则幼小原胚的有效转化频率约为球形胚的７倍．