硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物的制备

为利用硒原子的反常散射获取抗烟毒素蛋白晶体X射线衍射的相位信息，以质粒pQE-30为表达载体，E.coli M15为宿主菌，在含有硒代甲硫氨酸的M9培养基中用IPTG诱导表达硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物，通过Ni-NTA金属亲合层析和Mono Q阴离子交换层析纯化目标蛋白，产物经SDS－PAGE检验纯度达95％以上，经MALDI－TOF和SEI－Quadrupole质谱检测证实抗烟毒素蛋白硒代甲硫氨酸标记成功，采用与抗烟毒素蛋白晶体生长类似的条件，获得了衍生物可供衍射的晶体。