优质HMW谷蛋白亚基转基因小麦的获得及其遗传稳定性和品质性状分析

利用编码除草剂PPT抗性的bar基因作为选择标记，构建了含有优质HMW谷蛋白亚基1Dx5和1Dy10基因的植物表达载体pBPC30，用基因枪导入京花1号、京411号和京冬6号等受体品种的幼胚和幼穗，获得了一批转基因小麦植株（T0）及其后代株系（T1－T5）。PCR，点杂交和Southern杂交鉴定表明，外源基因已整合到转化植株T0的基因组，并稳定表达。转基因植株T1代能抗20－80mg/L的PPT，其中1株抗性超过150mg/L。经SDS－PAGE分析表明，外源1Dx5和1Dy10基因在T2代不同株系中获得了表达。转基因系TG3－74缺失了亚基8，但亚基2，5，10和12都表达，同时出现了一个新的亚基位于亚基7与原有亚基8之间（暂记为8）。品质分析结果表明，有5个株系的Zeleny沉淀值为44.2-49.0mL，与对照CNN（48.0mL)相当，分别比京花1号（26.9mL)和京冬6号（30.7mL)提高了59.6%-64.3%。T5代株系的粉质曲线稳定时间比受体品种（3－7min)大幅增长，转基因株系TG5－23b的稳定时间为16min，TG1－28d，TG3－76b，TG5－98和TG5－99的面团稳定时间高达30min以上。