dsRNA对家蚕核多角体病毒(BmNPV)复制的抑制作用

以BmNPV复制必需的DNA解旋酶基因和DNA聚合酶基因为靶序列，人工设计并合成了长度分别为435(Ap1)，300(Ap2)和399bp(AH)的dsRNAs，利用TransMessenger^TM Transfection Reagent转染家蚕细胞，研究其对BmNPV复制的抑制效果．结果表明，在野生型病毒BmNPV感染家蚕细胞实验中，Ap2和AH这2个dsRNA能够有效地抑制病毒DNA的复制，并且在转染dsRNA后第4天抑制效果最佳，它们使病毒滴度(PFU／mL值)降低了10^3～10^4，而另外的dsRNA(Ap1)没有明显的抑制效果．RT—PCR和DNA斑点杂交也证实了2种目的基因的表达水平和病毒DNA的量发生了明显的下调．此外，用荧光显微镜观察dsRNA在细胞内的定位，发现在转染24h后dsRNA开始在细胞核的周围呈不连续的聚集状态。