THE RESPONSE OF VARIOUS YEAST STRAINS SUBJECTED TO ULTRA-LOW TEMPERATURE FREEZING AND THAWING
各种酵母菌经超低温冻结和融化后的反应

本文报告用液氮超低温(一196℃)冻结和融化后，对酵母菌的影响。34种酵母菌经慢速(冷却速度为1℃／min)冻结后细胞成活率普遍高于快速(冷却速度为450℃／min)冻结。10％甘油和10c2自二甲亚砜比水在冻结中呈现出显著的保护作用。冻结保藏4个月后，细胞成活率都在11％以上，最高达97％，平均70．4％，而水，最低者仅0．4％，最高87%，，平均46．5％。所观察的白地霉Geotrichum candidum AS 2．361，椭圆酿酒酵母 Saccharomyces cere-visiae var．Ellipsoideus AS 2.541，八孢裂殖酵母 Schizosaccharomyces octosporus AS 2．1148，其细胞在冻结过程中的形态，最初质壁分离，继之整个细胞收缩，而融化后则可复元． 解脂假丝酵母 Candida lipolytica AS 2．1207和2．1405经冻结48小时以上，融化后的细胞悬液直接接种培养后检测脂肪酶活力；酿酒酵母 Saecharomyces cerevtsiae AS 2．399和椭圆酿酒酵母As 2．541冻结48小时后乙醇发酵力；异常汉逊酵母 Hansenula auomala AS 2.300和AS 2．470冻结后形成乙酸乙酯的能力，都无明显的减退，而且以甘油作保护剂的细胞，较未经冻结者呈现出稍强的活力。就代谢产物而言，用气相色谱法分析发酵液，乙醇或乙酸乙酯都是很纯的终产物。嗜渗压的固囊酵母Citteromyces natritensis AS 2.1401和汉逊德巴利酵母Debaryomyces hansenii AS 2.45冻结后的细胞耐NaCl的能力无改变．冷冻真空干燥法保藏菌种，适合的菌类较广，是久经考验的方法。但是对于酵母菌冻干后细胞成活率平均为8．6％，而超低温冻结24小时细胞成活率平均为86．7％，大了10倍。