弓形虫RH株表面抗原SAG3去信号肽基因的蛋白原核表达及鉴定

根据GenBank 中弓形虫表面抗原SAG3 基因序列,以弓形虫总RNA 反转录的cDNA为 模板 ,扩增出SAG3 去除信号肽基因并进行原核表达。将重组pET28a(+)SAG3阳性表达质粒转 入 大肠杆菌BL(DE3)中,用IPTG 进行诱导表达。通过SDS-PAGE 和Western blotting 对重组蛋 白进行分析和鉴定。结果表明:成功扩增了不含信号肽的SAG3基因,构建的原核表达质粒在大 肠杆菌中得到了高效表达,能够与鼠抗弓形虫阳性血清发生特异性反应,去信号肽的SAG蛋白 具有反应原性。