依赖于DNA的RNA聚合酶与体外转录的研究I．酵母变异株20B-12 RNA聚合酶A和C的纯化及鉴定

从酵母变异株20B一12经过超声波处理、硫酸铵沉淀、DEAE纤维素和磷酸纤维素层析等步骤，纯化依赖于DNA的RNA聚合酶A和C，得到聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的条带。其中不含Dnase、Rnas：和蛋白酶活力，无内源．DNA。测定了RNA聚合酶A和c对弘鹅膏蕈碱的敏感性。酶A在a-鹅膏荤碱为400μg／ml时，活性受到抑制，而酶c在该浓度时，几乎不受抑制。(NH4)zSO4对酶A的最适浓度为20mM，对酶C有二个最适浓度，分别为40raM和240raM。无二价金属离子Mn+或Mg2+，酶A和c几乎无活力。两种酶最适Mn2+浓度均为2.5mM，Mg2+浓度均为5mM。两种酶以热变性小牛胸腺DNA为模板，测活性均较天然小牛胸腺DNA为模板时高。