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ISSN: 2333-9721
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海洋科学  2010 

Calcium-activated potassium channels expressed by the haemocytes of Eriocheir sinensis
中华绒螯蟹血淋巴细胞钙激活钾通道研究

Keywords: Eriocheir sinensis,Haemocytes,Calcium-activated potassium channel,Patch clamp,Inside-out recording
中华绒螯蟹(Eriocheir
,),血淋巴细胞,钙激活钾通道,膜片钳,内面向外式

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Abstract:

利用膜片钳技术之内面向外式, 对培养2~24 h 不同类型的中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)血淋巴细胞表达的钙激活钾 (KCa)通道进行种类鉴别和特征研究。结果表明:在高对称钾溶液 (200 mmol/L)中, 只有小颗粒细胞表达大电导钙激活钾 (BKCa)通道和中电导钙激活钾 (IKCa)通道。其中BKCa 通道电导为396 pS, 通道的开放活动表现为矩形方波。同一钳制电压下, 当浴液中Ca2+]在0.3~3.0 μmol/L范围内, 通道开放概率和开放数目随Ca2+浓度增加而增加, 当浴液中Ca2+]达到100.0 μmol/L, 通道开放受到抑制, 表现明显的钙依赖性失活; 当浴液中Ca2+浓度为3.0 μmol/L, 钳制电压分别为-40 mV 和-80 mV 时, 通道平均开放时间分别为(0.032 33±0.007 41) s 和(0.055 85±0.012 99) s (P<0.01), 平均开放概率分别为0.596±0.125 和0.961±0.012 (P<0.01), 说明通道开放具有电压依赖性。IKCa 通道电导为88 pS, 开放活动也表现为矩形方波。当浴液中Ca2+浓度为0.3、1.0μmol/L 时, 通道不开放; 而Ca2+浓度为3.0 μmol/L 时通道开放, 说明通道具有明显的钙依赖性, 钳制电压分别为-40 mV 和-80 mV 时,通道平均开放时间分别为(0.017 36±0.004 03)s 和(0.022 62±0.016 16)s (P>0.05), 平均开放概率分别为0.699±0.065 和0.790±0.114 (P>0.05), 说明通道开放不具有明显的电压依赖性。药理学研究结果表明, 40mmol/L 四乙铵 (TEA)灌流15 min 能完全阻断KCa 通道活动。这提示钙激活钾通道在甲壳动物细胞免疫中发挥重要作用。

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