Construction of Hg2+-induced Luminescent Reporter Gene System and Its Application to Detect Mercury in Red Soil
Hg2+诱导发光报告基因系统的构建及其检测红壤中残汞的研究

将汞诱导型启动子PmerT和其调控基因merR与egfp基因融合构建发光报告基因系统.通过mini-Tn5系统把merR-egfp插入到Pseudomonas putida染色体DNA上，构建成为在Hg2+诱导下能特异性表达绿色荧光蛋白的工程菌，并将其应用于检测江西红壤中汞污染.当土壤中汞含量在0.04～50 mg·kg-1范围内时，采用流式细胞仪测定工程菌表达的荧光强度，发现荧光强度与汞污染的含量呈正相关，且最低检测含量为0.04 mg·kg-1.土壤背景中一定含量的Cr2+、 Zn2+、 Co2+、 Cu2+、 Pb2+、 Ag+对汞污染测定均无显著影响.正交试验结果表明，孵育温度是影响荧光测定的主要因素，其最佳范围为30～35℃.将初始含量为0.1 mg·kg-1的Hg2+添加入江西红壤并孵育15和30d后，运用原子吸收和工程菌分别对残汞进行检测，结果显示工程菌对可溶性残汞、 生物质残汞、 有机残汞和剩余残汞均有响应，有效检出35%～64%，其有效性限与传统分析方法一致。