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OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
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CLONING AND OVEREXPRESSION OF ACAUDINA LEUCOPROCTA ARGININE KINASE
白肛海地瓜(Acaudina leucoprocta)精氨酸激酶的基因克隆与表达

Keywords: Acaudina leucoprocta,Arginine kinase,Prokaryotic expression,Polyclonal antibody
白肛海地瓜
,精氨酸激酶,原核表达,多克隆抗体

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Abstract:

精氨酸激酶是调节能量代谢的重要酶类,在无脊椎动物体内能量平衡过程中起重要作用。利用PCR扩增技术,从白肛海地瓜的cDNA文库中克隆得到精氨酸激酶(arginine kinase)基因,其全长为2139bp,包括5′非翻译区(5’-UTR)序列92bp,3′端非翻译区(3’-UTR)序列934bp和1113bp的ORF,编码371个氨基酸,预测分子量大小和等电点分别为42.32kDa和7.19。构建了精氨酸激酶原核表达质粒并转化表达菌株,经IPTG诱导表达后,获得了与预期的分子量大小一致的表达产物。利用该目的蛋白制备了白肛海地瓜精氨酸激酶的特异性多克隆抗体,经Western blot证明该蛋白为精氨酸激酶。

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