DEVELOPMENT OF CULTURING EMILIANIA HUXLEYI IN SELENIUM AND PURIFICATION OF ITS SELENOPROTEINS
富硒海洋球石藻(Emiliania huxleyi)的培养及其硒蛋白的初步分离纯化

在不同浓度亚硒酸钠(Na2SeO3)条件下培养海洋球石藻, 分析其生长和富集硒情况, 并采用(NH4)2SO4 分级盐析、DEAE-Sepharose 离子交换柱层析和 Sephacryl S-200 凝胶过滤层析方法, 对球石藻硒蛋白进行了初步分离纯化。结果表明, 在本实验条件下, 不添加外源硒的 f/2 培养基本底硒浓度(约 3.2nmol/L)为海洋球石藻最佳生长和富硒的硒浓度, 其细胞内硒含量可达到 6475?g/g 干重。离子交换和凝胶层析分离的含硒蛋白结合的最高硒含量分别达到 392.3ng/mg 和 663.5ng/mg 蛋白。SDS-PAGE 纯度鉴定显示, 在分子量分别约为 41.3kDa 和 30.1kDa 处各有单一电泳条带。结果提示, 海洋球石藻能在环境硒浓度极低的条件下大量吸收硒并将大部分无机硒转化为硒蛋白。富硒能力较强的海洋球石藻有望作为一种新的有机硒资源, 对开发含硒安全性食品具有很大的应用潜力。