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过程工程学报 2006
Cryopreservation of Cistanche deserticola Callus
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Abstract:
提出了一个优化的简单的超低温保藏方法,成功地运用于肉苁蓉愈伤组织的低温保藏. 为了获得最佳的实验结果,肉苁蓉愈伤组织首先在添加了6%二甲亚砜的B5培养基中进行预培养,然后用玻璃化保护剂在25℃处理20 min,最后投入液氮中进行冷冻. 玻璃化保护剂的成分为30%(ψ)甘油 15%(ψ)乙二醇 10%(ψ)二甲亚砜 0.5 mol/L蔗糖. 冷冻后的愈伤组织在30℃的水浴中迅速解冻,接着用25℃的1.0 mol/L蔗糖溶液洗净愈伤组织上附着的玻璃化保护剂,最后在B5培养基上对愈伤组织进行恢复性培养. 经过上述冻存处理的肉苁蓉愈伤组织存活率可达86%. 恢复培养5个月后,愈伤组织中苯乙醇糖甙类化合物的含量和产量分别达到冷冻前的97%和95%.
