Molecular Cloning and Sequence Analyses of cDNAs Encoding Seven C-type Lectin-like Protein Subunits from Daboia russellii siamensis
圆斑蝰蛇毒七个C-型凝集素样蛋白亚基的cDNA克隆与序列分析(英文)

按照Promega公司的mRNA提取试剂盒操作手册，从圆斑蝰蛇（Daboia russellii siamensis）的毒腺中提取mRNA；利用RT-PCR的方法进行体外扩增，获得C-型凝集素蛋白的基因，克隆到pMD18-T载体中。随机挑选14个阳性克隆进行核酸测序，获得7个编码不同蛇毒C-型凝集素样蛋白亚基的cDNA，分别命名为DRS-L1、DRS-L2、DRS-L3、DRS-L4、DRS-L5、DRS-L6和DRS-L7。由基因序列推导出的氨基酸序列表明，克隆到的7个蛇毒C-型凝集素样蛋白的亚基中均有糖识别结构域存在。BLAST分析显示，仅有DRS-L1的蛋白序列与目前已知的蛇毒C-型凝集素样蛋白的α亚基相似。序列同源性比较并结合半胱氨酸位点分析，推测DRS-L1和DRS—L2可能分别是圆斑蝰蛇毒X因子激活剂的轻链LC2和LC1。DRS-L3和DRS-L4可能是高分子量的蛇毒C-型凝集素样蛋白的β亚基，而DRS-L5和DRS-L6可能是低分子量的蛇毒C-型凝集素样蛋白的β亚基。DRS—L7可能是类似于血小板膜糖蛋白Ib结合蛋白的β亚基。