翘嘴鳜NADPH氧化酶三个调节亚基cDNA的克隆及表达特征

吞噬细胞NADPH氧化酶能生成用于清除病原微生物的活性氧簇 (reactive oxygen species, ROS)，在机体的防御体系中起着非常重要的作用。该文利用RT-PCR结合RACE-PCR的方法，对翘嘴鳜 (Siniperca chuatsi) NADPH氧化酶的3个调节亚基p40phox、p47phox和p67phox的cDNA进行了克隆。结果显示p40phox基因cDNA序列全长为1 406 nt，开放阅读框长度为1 050 nt，翻译成349个氨基酸；p47phox 基因cDNA序列全长为1 686 nt，开放阅读框为1 209 nt，翻译成402个氨基酸；p67phox基因cDNA序列全长为2 185 nt，开放阅读框长度为1 488 nt，翻译成495个氨基酸。半定量PCR分析显示在翘嘴鳜血液、脑、鳃、性腺、心脏、头肾、肠、肾、肝、脾、胸腺组织中都能检测到这3个亚基的mRNA表达，然而，它们在不同组织中的表达强度具有差异。经柱状黄杆菌灭活苗FKG4免疫后，p40phox亚基mRNA在翘嘴鳜血液和头肾中的表达量显著上升，p47phox在头肾和脾脏中的表达量显著上升，而p67phox在血液、头肾和脾脏中的表达量均显著上升。由此推断NADPH氧化酶参与了翘嘴鳜机体的抗菌免疫应答。