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ISSN: 2333-9721
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恒河猴大脑前额叶cDNA文库的构建

Keywords: 恒河猴,大脑前额叶,cDNA文库,大脑表达基因

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为筛选出与认知、记忆相关的脑部表达基因及基因家族,利用TRIzol试剂从恒河猴大脑前额叶组织抽提总RNA,再用纯化试剂盒从总RNA中成功纯化出mRNA。按照Stratagene公司的cDNA Synthesis Kit(200401)、ZAP-cDNA Synthesis Kit(200400)和ZAP-cDNA GigapackⅢ Gold Cloning Kit(200450)三个试剂盒的操作说明,构建了恒河猴大脑前额叶组织的cDNA文库。文库总库容为2.0×10 6克隆;绝大多数的cDNA插入片段≥0.5 kb,平均长度≈1.0 kb;cDNA片段与噬菌体载体重组率为97.3%。文库各项指标均达要求,为克隆大脑PFC区表达基因、测定基因编码区序列、揭示具有多种剪切组合模式等提供了可靠资源,也为相关基因表达调控的研究提供了方便。

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