Construction of eIF-4e adenovirus and its effect on metastasis ability of human breast cancer cell line MCF-7
eIF-4E腺病毒载体构建及对乳腺癌MCF-7细胞转移能力的影响

目的:构建乳腺癌真核细胞起始因子--4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF-4E)基因重组腺病毒载体,并观察其对乳腺癌细胞MCF-7转移能力的影响.方法:应用基因重组技术将eIF-4E基因构建于腺病毒载体pAD-X,转染293包装细胞得到高滴度重组腺病毒,并用real-time PCR进行eIF-4E基因表达的验证.将重组腺病毒pAD-eIF-4E感染MCF-7细胞,应用siRNA封闭eIF-4E后通过transwell小室法观察其对细胞侵袭和运动能力的影响.结果:酶切结果与预期相符,real-time PCR可检测到转染后MCF-7细胞有eIF-4E基因过表达.且病毒转染后transwell小室可见,与eIF-4E过表达组相比较,eIF-4E siRNA封闭组MCF-7细胞的侵袭和运动能力均受到显著的抑制(均为p<0.01).结论:重组eIF-4E腺病毒载体正确构建,抑制eIF-4E的表达,对乳腺癌细胞MCF-7的侵袭和运动都有抑制作用.