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中国生物工程杂志 2006
Study on the CXXC Activity Motif of Human Augmenter of Liver Regeneration
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Abstract:
人肝再生增强因子(human augmenter of liver regeneration,hALR)蛋白序列中有一段保守的Cys—Xaa—Xaa—Cys(CXXC)氨基酸序列,针对hALRp的CXXC结构,对hALR分别进行C65A和Q88c突变,表达、纯化突变体蛋白。体外检测hALRp和突变体的黄素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine dinucleotide,FAD)辅助的巯基氧化酶活性,hALR—FAD和hALRQ88C—FAD组与对照组比较有显著差异(P〈0.05),hALR,FAD和hALRQ88C—FAD组之间无差异;hALRC65A—FAD组与对照组比较无差异。结果显示,通过C65A突变将CXXC结构破坏后,该突变体的巯基氧化酶活性完全丧失;通过Q88c突变增加一个CXXC序列后,该突变体的巯基氧化酶活性较hALR—FAD未见明显增加;同时,FAD不仅是hALRp发挥巯基氧化酶活性必须的辅助因子,而且有助于hALRp突变体蛋白的复性。