Prokaryotic Expression of Integrase Enzyme of HIV-1 and The Function Study of Intergrase Protein
HIV-1整合酶蛋白的可溶性表达及功能研究

HIV一1整合酶是HIV病毒复制中一个重要的酶，也是治疗艾滋病药物的一个重要靶点。为了开展以整合酶蛋白为靶羔的抑制剂筛选，构建HIV-1整合酶重组质粒，在原核细胞中进行可溶陛表达和功能研究。通过重叠PCR技术引入F185K和C280S突变于HIV-1 B亚型标准株的整合酶cDNA片段中，PCR扩增片段克隆到pET-28a（＋）表达载体中，构建重组质粒，在Ecoli中进行整合酶基因表达，SDS—PAGE鉴定表达产物，亲和层析纯化蛋白，酶联免疫吸附实验方法测定整合酶的生物学活性。结果构建的重组质粒获得高效稳定的可滏瞅，ELISA实验证实该蛋白具有整合酶的3’切割DNA和5’链转移的活性。HIV-1整合酶蛋白的可溶性表达和活性研究为建立以整合酶为靶点的抗HIV药物筛选平台打下了基础。