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中国生物工程杂志 2006
Construction of NADH regeneration system in Klebisella pneumoniae with inactivation of aldehyde dehydrogenase
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Abstract:
生物法生产1,3-丙二醇(1,3-Propanediol,1,3-PD)是当前工业生物技术研究的热点之一,生产过程中,需要消耗还原当量NADH,NADH的有效供给决定了1,3-PD的产量和得率。采用PCR的方法从Candida boidinii基因组中克隆编码fdh的基因,将该基因片段插入载体pMAL^TM-p2X,构建表达载体pMAL^TM-p2X-fdh,并转入醛脱氢酶失活菌Klebsiella pneumoniae DA-1HB,获得重组菌Klebsiella pneumoniae DAF-1。在IPTG浓度0.5mmol/L时,诱导3h后甲酸脱氢酶表达明显;发酵过程中甲酸脱氢酶比酶活达到4.82U/mg;与出发菌株Kpneumoniae DA-1HB相比,重组茵DAF-1合成1,3-丙二醇的浓度提高了19.2%。