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中国生物工程杂志 2006
Studies of the Expression and Biologic Activity of an Anti- transferrin Receptor ScFv-BDNF Fusion Protein
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Abstract:
脑源性神经营养因子（BDNF）对中枢神经系统的多种神经元具有营养、修复和保护功能,但因无法通过血脑屏障限制了其应用.利用抗转铁蛋白受体（TfR）的单链抗体（ox26-scFv）作为脑转运载体,分别扩增单链抗体和BDNF基因,插入pTIG-Trx载体,构建融合基因表达载体pTIG-Trx/scFv-BDNF,在大肠杆菌BL21（DE3）中实现了高效表达.经Ni-NTA金属螯合层析柱纯化后,在41kDa处可见目的纯化条带.大鼠GH3细胞免疫酶染色显示,ScFv-BDNF融合蛋白能与转铁蛋白受体特异性结合,同时能够促进鸡胚背根节神经突起的生长,具备了BDNF的生物学活性.为使BDNF能够跨越血脑屏障成为中枢神经系统的治疗药物打下了实验基础.
