DNA shuffling of Vitreoscilla Hemoglobin
透明颤菌血红蛋白的DNA改组研究

为提高透明颤菌血红蛋白在限氧条件下促进宿主细胞生长的能力,首先采用易错PCR向透明颤菌血红蛋白基因中引入突变,再结合DNA改组对其进行改造,将改组基因置于透明颤菌血红蛋白天然启动子下游,转化大肠杆菌DH5α,构建改组文库,以限氧培养条件下菌体沉淀的颜色为指标进行试管初筛,再以限氧和极端限氧条件下菌体湿重为指标进行摇瓶复筛,最终得到一个高活性突变蛋白VHb′042506。该蛋白使宿主菌体的湿重在限氧和极端限氧条件下较原基因转化子分别提高了31.25%和58.75%。经测序比对,该基因较原基因发生了11处碱基点突变,致氨基酸4处错义突变。CO差光谱显示该蛋白具有更强的特征吸收。